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液相色譜儀驗(yàn)證

1．液相色譜儀介紹

液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異，對(duì)混合物進(jìn)行先分離，然后分析鑒定物質(zhì)成分及含量的儀器。高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液，不受樣品揮發(fā)性的限制，流動(dòng)相可選擇的范圍寬，固定相的種類繁多，因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合，HPLC所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度，使分離和同時(shí)測(cè)定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)成為可能，能夠分離復(fù)雜相體中的微量成分。由于HPLC具有高分辨率、 高觀靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用，流出組分易先收集等優(yōu)點(diǎn)，因而被廣泛應(yīng)用的生物化學(xué)，食品分析，醫(yī)藥研究，環(huán)境分析，無機(jī)分析等各種領(lǐng)域。

2．液相色譜儀的原理

液相色譜儀由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，被流動(dòng)相載入色譜柱（固定相）內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出，通過檢測(cè)器時(shí)，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。

3．為什么液相色譜儀要做驗(yàn)證呢？

這是為了保證液相色譜儀分析檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，所以必須對(duì)所用到的組成系統(tǒng)各部分進(jìn)行驗(yàn)證，以證明該系統(tǒng)符合檢測(cè)的目的和要求，這就是儀器驗(yàn)證。從本質(zhì)上講，儀器驗(yàn)證就是根據(jù)檢測(cè)物質(zhì)的要求，預(yù)先對(duì)儀器設(shè)置一定的參數(shù)范圍及合適的檢測(cè)器，并通過設(shè)計(jì)合理的試驗(yàn)來驗(yàn)證該儀器是否符合檢測(cè)項(xiàng)目的要求。儀器驗(yàn)證是保證整個(gè)試驗(yàn)是否能成功的先決條件，只有經(jīng)過驗(yàn)證的儀器，確保該儀器各部分都在良好的情況下才能用于物質(zhì)成分的分析檢測(cè)，這樣使檢測(cè)結(jié)果更準(zhǔn)確，盡可能減小誤差。

4．液相色譜儀的驗(yàn)證項(xiàng)目

（1）安裝確認(rèn)

a. 文件確認(rèn)

b. 附件確認(rèn)

c. 安裝環(huán)境確認(rèn)

d. 安裝情況確認(rèn)

（2）運(yùn)行功能確認(rèn)

a. 運(yùn)行功能確認(rèn)

b. 軟件控制功能測(cè)試

c. 流速設(shè)定誤差測(cè)試

d. 流速重復(fù)性測(cè)試

e. 柱溫設(shè)定誤差測(cè)試

f. 柱溫穩(wěn)定性測(cè)試

（3）性能確認(rèn)

a. 基線噪聲測(cè)試

b. 基線漂移測(cè)試

c. 檢測(cè)限測(cè)試

d. 重復(fù)性測(cè)試

5．液相色譜儀使用的注意事項(xiàng)如下

（1）流動(dòng)相均需色譜純度，使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)（使用0.45μm或更細(xì)的膜過濾）。

（2）流動(dòng)相過濾后要用超聲波脫氣，脫氣后應(yīng)該恢復(fù)到室溫后使用，脫氣后的流動(dòng)相要小心振動(dòng)盡量不引起氣泡。

（3）不能用純乙腈作為流動(dòng)相，這樣會(huì)使單向閥粘住而導(dǎo)致泵不進(jìn)液。

（4）長(zhǎng)時(shí)間不用儀器，應(yīng)該將柱子取下用堵頭封好保存，注意不能用純水保存柱子，而應(yīng)該用有機(jī)相(如，甲醇等)，因?yàn)?，純水易長(zhǎng)霉。

（5）更換流動(dòng)相時(shí)應(yīng)該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動(dòng)邊靖洗，然后插入新的流動(dòng)相中。更換無互溶性的流動(dòng)相時(shí)要用異丙醇過渡一下。

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